詞條
詞條說(shuō)明
Hepes緩沖液用于細(xì)胞培養(yǎng)研究中需要注意什么?
HEPES是一種兩性離子有機(jī)化學(xué)緩沖劑,二十個(gè)Good緩沖劑之一。在無(wú)細(xì)胞制劑的比較生物學(xué)分析中被證明優(yōu)于傳統(tǒng)緩沖液。它具有許多特性,使其非常適合作為組織培養(yǎng)基的緩沖劑,并且不需要特殊的環(huán)境即可保持正確的pH值。HEPES不結(jié)合二價(jià)陽(yáng)離子,在0°C時(shí)可溶至2.25M。注意:由于DpKa /°C為-0.014,因此記錄在HEPES緩沖介質(zhì)中的pH值將隨介質(zhì)溫度成反比。 大多數(shù)組織培養(yǎng)基被碳酸氫鈉和5
Tris(三羥甲基氨基甲烷)是生化實(shí)驗(yàn)中最常使用的緩沖液,因?yàn)樗泻玫木彌_能力、毒性低、對(duì)生物反應(yīng)的干擾極低,而且純度很高。有超過(guò)磷酸鹽的趨勢(shì),如在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中都已開始實(shí)驗(yàn)TRIS緩沖液,很少再用磷酸鹽。在分子生物實(shí)驗(yàn)中使用也很廣泛。 1、TRIS(三羥甲基氨基甲烷)的應(yīng)用 ① 在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定P值; ② 在凝膠中使用TRIS-HCL緩沖體系穩(wěn)定PH值; ③
在醫(yī)院的一些臨床檢驗(yàn)中,使用全血或血漿檢查,通常采集靜脈血做檢查標(biāo)本,根據(jù)不同的檢查需求,也會(huì)添加不同的抗凝劑。在體外診斷的特定領(lǐng)域中,通常將抗凝劑添加到采血管中防止血液凝固形成血凝塊,以保持血液的流動(dòng)性方便進(jìn)行血液檢測(cè)。乙二胺四乙酸 (EDTA) 是一種多元酸,含有四個(gè)羧酸基團(tuán)和兩個(gè)胺基團(tuán),帶有孤對(duì)電子,可螯合鈣和其他幾種金屬離子。鈣是凝血級(jí)聯(lián)的各種酶反應(yīng)的必需物質(zhì),EDTA與鈣離子結(jié)合形成螯合
酶聯(lián)免疫或化學(xué)發(fā)光免疫分析的對(duì)象包括有酶、蛋白、抗體、多肽、抗原、核酸、糖、脂質(zhì)等物質(zhì),其中酶、蛋白、抗體或多肽均屬于蛋白類分子,需要使用蛋白緩沖液來(lái)保護(hù)蛋白。 1.生物緩沖液,包括有Tris-HCl緩沖液、Tricine緩沖液、PB磷酸緩沖液、CB碳酸緩沖液等,其中Tris的緩沖體系應(yīng)用較為普遍,緩沖能力比較強(qiáng),同時(shí)對(duì)蛋白有良好的溶解性,為蛋白提供合適的pH環(huán)境。 2.鹽類,主要是氯化鈉,調(diào)節(jié)蛋
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