微生物限度檢測(cè)原理和應(yīng)用范圍

時(shí)間：2022-04-29作者：上海川宏實(shí)驗(yàn)儀器有限公司瀏覽：576

微生物的檢測(cè)，無(wú)論在理論研究還是在生產(chǎn)實(shí)踐中都具有重要的意義，本文對(duì)生長(zhǎng)量測(cè)定法、微生物計(jì)數(shù)法、生理指標(biāo)法和商業(yè)化快速微生物檢測(cè)簡(jiǎn)要介紹了利用微生物重量，體積，大小，生理代謝物等指標(biāo)的二十余種常用的檢測(cè)方法，簡(jiǎn)要介紹了這些方法的原理，應(yīng)用范圍和優(yōu)缺點(diǎn)。
一個(gè)微生物細(xì)胞在合適的外界條件下，不斷的吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并按自己的代謝方式進(jìn)行新陳代謝。如果同化作用的速度**過(guò)了異化作用，則其原生質(zhì)的總量（重量，體積，大?。┚筒粩嘣黾?，于是出現(xiàn)了個(gè)體的生長(zhǎng)現(xiàn)象。如果這是一種平衡生長(zhǎng)，即各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)時(shí)，則達(dá)到程度后就會(huì)發(fā)生繁殖，從而引起個(gè)體數(shù)目的增加，這時(shí)，原有的個(gè)體已經(jīng)發(fā)展成一個(gè)群體。隨著群體中各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng)，就引起了這一群體的生長(zhǎng)，這可從其體積、重量、密度或濃度作指標(biāo)來(lái)衡量。微生物的生長(zhǎng)不同于其他生物的生長(zhǎng)，微生物的個(gè)體生長(zhǎng)在科研上有困難，通常情況下也沒(méi)有實(shí)際意義。微生物是以量取勝的，因此，微生物的生長(zhǎng)通常指群體的擴(kuò)增。微生物的生長(zhǎng)繁殖是其在內(nèi)外各種環(huán)境因素相互作用下的綜合反映。因此生長(zhǎng)繁殖情況就可作為研究各種生理生化和遺傳等問(wèn)題的重要指標(biāo)，同時(shí)，微生物在生產(chǎn)實(shí)踐上的各種應(yīng)用或是對(duì)致病，霉腐微生物的防治都和他們的生長(zhǎng)抑制緊密相關(guān)。所以有必要介紹一下微生物生長(zhǎng)情況的檢測(cè)方法。既然生長(zhǎng)意味著原生質(zhì)含量的增加，所以測(cè)定的方法也都直接或間接的以次為根據(jù)，而測(cè)定繁殖則都要建立在計(jì)數(shù)這一基礎(chǔ)上。微生物生長(zhǎng)的衡量，可以從其重量，體積，密度，濃度，做指標(biāo)來(lái)進(jìn)行衡量。
1. 微生物計(jì)量法
1.1 體積測(cè)量法
又稱測(cè)菌絲濃度法，通過(guò)測(cè)定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來(lái)反映微生物的生長(zhǎng)狀況。方法是，取量的待測(cè)培養(yǎng)液（如10 mL）放在有刻度的離心管中，設(shè)定的離心時(shí)間（如5 min）和轉(zhuǎn)速（如5000 rpm），離心后，倒出上清夜，測(cè)出上清夜體積為v，則菌絲濃度為（10-v）/10。菌絲濃度測(cè)定法是大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長(zhǎng)的一個(gè)重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。這種方法比較粗放，簡(jiǎn)便，快速，但需要設(shè)定一致的處理?xiàng)l件，否則偏差很大，由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營(yíng)養(yǎng)物，結(jié)果會(huì)有偏差。
稱干重法
可用離心或過(guò)濾法測(cè)定。一般干重為濕重的10~20%。在離心法中，將體積待測(cè)培養(yǎng)液倒入離心管中，設(shè)定的離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速，進(jìn)行離心，并用清水離心洗滌1~5次，進(jìn)行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用紅外線烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后稱重。如用過(guò)濾法，絲狀真菌可用濾紙過(guò)濾，細(xì)菌可用醋酸纖維膜等濾膜過(guò)濾，過(guò)濾后用少量水洗滌，在40 ℃下進(jìn)行真空干燥。稱干重發(fā)法較為煩瑣，通常獲取的微生物產(chǎn)品為菌體時(shí)，常采用這種方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌體為活性物質(zhì)的飼料和肥料。
1.3 比濁法
微生物的生長(zhǎng)引起培養(yǎng)物混濁度的增高。通過(guò)紫外分光光度計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)下的吸光值，判斷微生物的生長(zhǎng)狀況。對(duì)某一培養(yǎng)物內(nèi)的菌體生長(zhǎng)作定時(shí)跟蹤時(shí)，可采用一種特制的有側(cè)臂的三角燒瓶。將側(cè)臂插入光電比色計(jì)的比色座孔中，即可隨時(shí)測(cè)定其生長(zhǎng)情況，而不必取菌液。該法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)。如使用UNICO公司的紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，在波長(zhǎng)600 nm處用比色管定時(shí)測(cè)定發(fā)酵液的吸光光度值OD600，以此監(jiān)控E.coli的生長(zhǎng)及誘導(dǎo)時(shí)間。
1.4 菌絲長(zhǎng)度測(cè)量法
對(duì)于絲狀真菌和一些放線菌，可以在培養(yǎng)基上測(cè)定時(shí)間內(nèi)菌絲生長(zhǎng)的長(zhǎng)度，或是利用一只一端開(kāi)口并帶有刻度的細(xì)玻璃管，到入合適的培養(yǎng)基，臥放，在開(kāi)口的一端接種微生物，一段時(shí)間后記錄其菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度，借此衡量絲狀微生物的生長(zhǎng)。
2. 微生物計(jì)數(shù)法
2.1 血球計(jì)數(shù)板法
血球計(jì)數(shù)板是一種有結(jié)構(gòu)刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四條溝和兩條嵴，*有一短橫溝和兩個(gè)平臺(tái)，兩嵴的表比兩平臺(tái)的表面高0.1 mm，每個(gè)平臺(tái)上刻有不同規(guī)格的格網(wǎng)，*0.1 mm2面積上刻有400個(gè)小方格。通過(guò)油鏡觀察，統(tǒng)計(jì)大格內(nèi)微生物的數(shù)量，即可算出1 mL菌液中所含的菌體數(shù)。這種方法簡(jiǎn)便，直觀，快捷，但只適宜于單細(xì)胞狀態(tài)的微生物或絲狀微生物所產(chǎn)生的孢子進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且所得結(jié)果是包括死細(xì)胞在內(nèi)的總菌數(shù)。
2.2 染色計(jì)數(shù)法


為了彌補(bǔ)一些微生物在油鏡下不易觀察計(jì)數(shù)，而直接用血球計(jì)數(shù)板法又無(wú)法區(qū)分死細(xì)胞和活細(xì)胞的不足，人們發(fā)明了染色計(jì)數(shù)法。借助不同的染料對(duì)菌體進(jìn)行適當(dāng)?shù)娜旧?，可以較方便的在顯微鏡下進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。如酵母活細(xì)胞計(jì)數(shù)可用美藍(lán)染色液，染色后在顯微鏡下觀察，活細(xì)胞為無(wú)色，而死細(xì)胞為藍(lán)色。




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• 詞條

  詞條說(shuō)明

• 生化培養(yǎng)箱的含義與作用

  生化培養(yǎng)箱具有制冷和加熱雙向調(diào)溫系統(tǒng)，溫度可控的功能，是生物、遺傳工程、醫(yī)學(xué)、衛(wèi)生防疫、環(huán)境保護(hù)、農(nóng)林畜牧等行業(yè)的科研機(jī)構(gòu)、大專院校、生產(chǎn)單位或部門(mén)實(shí)驗(yàn)室的重要試驗(yàn)設(shè)備，廣泛應(yīng)用于低溫恒溫試驗(yàn)、培養(yǎng)試驗(yàn)、環(huán)境試驗(yàn)等。生化培養(yǎng)箱控制器電路由溫度傳感器、電壓比較器和控制執(zhí)行電路組成。生化培養(yǎng)箱的特點(diǎn)是：1 采用鏡面不銹鋼內(nèi)膽，箱體采用鋼板噴塑，四角半圓弧，易清潔，箱內(nèi)隔板間距可調(diào)；2 屏幕液晶顯示 ，

• 全自動(dòng)氮吹儀操作指南說(shuō)明

  全自動(dòng)氮空吹掃濃縮儀通過(guò)自動(dòng)控制氮?dú)饣蚋稍餄崈舻目諝獯祾邩悠范_(dá)到快速將樣品濃縮的目的，使樣品前處理的時(shí)間大大縮短，大大提高工作效率；**的功能使操作人員不必守在儀器面前，大大降低了有毒有害氣體對(duì)人體的傷害，減少操作人員繁瑣費(fèi)力的操作過(guò)程。該儀器具有易操作，省時(shí)、安全、節(jié)約成本等特點(diǎn)。一、安裝儀器，連接氣路氣路的安裝要遵循安全科學(xué)的正確安裝方法，連接在氮?dú)怃撈繙p壓閥上或者隨機(jī)配置的氣源機(jī)上。二

• 薄膜蒸發(fā)器傳熱蒸發(fā)性能的實(shí)驗(yàn)研究

  薄膜蒸發(fā)器由于其刮板的機(jī)械刮擦成膜作用,使處理的物料在蒸發(fā)表面停留時(shí)間短而受熱效果好,適用于蒸發(fā)濃縮高粘性、熱敏性或易結(jié)晶物料,已經(jīng)廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)療、食品及輕工等行業(yè)1-3)。國(guó)內(nèi)外對(duì)薄膜蒸發(fā)器的傳熱系數(shù)和蒸發(fā)效率進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)室研究,但由于蒸發(fā)傳熱及刮板刮擦成膜的復(fù)雜性,用于蒸發(fā)設(shè)計(jì)計(jì)算的液膜側(cè)傳熱系數(shù)主要是液膜受熱的數(shù)據(jù)。對(duì)蒸發(fā)器的蒸發(fā)實(shí)驗(yàn)多以水為介質(zhì),有關(guān)粘性料液的傳熱數(shù)據(jù)則報(bào)道較少。

• 厭氧培養(yǎng)箱混合氣體的置換方法

  厭氧培養(yǎng)箱置換時(shí)混合氣體調(diào)整好混合氣體鋼瓶所需壓力（鋼瓶上減壓閥的輸出壓力），一般為0.1左右。打開(kāi)控制面板上的F3開(kāi)關(guān)，同時(shí)打開(kāi)真空泵開(kāi)關(guān)，讓其抽走取樣室內(nèi)的空氣?；旌蠚獬淙氩僮魇覂?nèi)，以手套向外伸直為止（不能過(guò)多充入，為防止手套爆裂。），此時(shí)應(yīng)關(guān)閉F3開(kāi)關(guān)，然后打開(kāi)F1和F2開(kāi)關(guān)，使操作室內(nèi)的氣過(guò)渡到取樣室內(nèi)，直到手套向內(nèi)伸直為止，為防止手套爆裂此時(shí)應(yīng)關(guān)閉F1與F2的開(kāi)關(guān)，這樣混合氣的置換完成了